产品货号:
JN5128
中文名称:
T4多聚核苷酸激酶(无甘油)
英文名称:
T4 Polynucleotide Kinase(Glycerol-Free)
产品规格:
200U
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1~3天
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T4多聚核苷酸激酶是一种多聚核苷酸5'羟基激酶,能够催化ATP的γ-位磷酸向双链/单链DNA或RNA以及带有3'磷酸基团的单核苷酸5'-羟基进行转移和交换:5'-OH + NTP5'↔P + NDP;该酶还具有3'磷酸酶活性,将3'-磷酸基团从寡核苷酸的3'磷酸末端、脱氧3' -单磷酸核苷和脱氧3'-二磷酸核苷上水解掉。本制品不包含甘油等影响冻干工艺的成分,可用于冻干反应体系的配制和产品设计。

- 引物或PCR产物的5'末端磷酸化以便进行连接反应;
- 合成DNA接头的5'末端磷酸化以便进行连接反应;
- DNA及RNA 5'末端的标记,用作寡核苷酸探针。

| 组分 | 规格 |
| T4 PNK (Glycerol-Free,10U/μL) | 20μL |
| 10mM ATP | 50μL |
| 10×T4 PNK Reaction Buffer | 1mL |
保存:-20℃,有效期1年。

以Micrococcal Nuclease处理的小牛胸腺DNA为底物,在37℃,pH7.6的条件下,30分钟内使1nmol的[γ-32P]ATP掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定义为1个活性单位。

经多次柱纯化,SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带,PCR方法检测无大肠杆菌DNA残留,无核酸内、外切酶、磷酸酶以及RNA酶活性污染。

- T4 PNK反应缓冲液中不含ATP,需在反应体系中加入终浓度为1mM的ATP,也可以使用T4 DNA连接酶的反应液代替。
- 铵离子强烈抑制T4 PNK活性,故DNA应溶于不含铵盐的溶液中。
- DTT氧化会造成酶活性下降,当缓冲液不新鲜时,需补加DTT。
- 10mM ATP和10×T4 PNK Reaction Buffer不可用于冻干。
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